共聚焦激光显微内镜是一种全新的内镜检查技术,它是在标准电子内镜的头端整合了激光共聚焦显微镜,从而提供类似于传统活检的放大倍数,对表面和表面下250pm的结构进行观察。随着示踪剂以及内镜成像技术的改进,共聚焦显微内镜有望在许多方面代替传统的病理学,是内镜技术的一项划时代进步。德国美茵茨大学Kiesslich以及Pech等进行了大量共聚焦激光显微内镜的相关研究,下面向读者介绍几项他们在采用该技术进行消化道疾病诊断中所取得的进展。
提高UC上皮内瘤变诊断率
病史较长的溃疡性结肠炎(UC)患者面临癌变的危险,定期结肠镜筛查有助于肿瘤的早期识别。然而,UC相关肿瘤的生长大多为扁平的和多局灶性的,普通内镜检查常会漏诊。Kiesslich等的研究表明,共聚焦激光显微内镜的在体组织学分析有助于对色素染色检出的病灶进行靶向活检,提高了UC上皮内瘤变的诊断率,减少了活检次数。
研究对象为153例长期(持续时间8年以上)处于临床缓解期的UC患者,将其随机分成两组,分别进行普通内镜检查及色素+共聚焦激光显微内镜检查。在色素+共聚焦激光显微内镜组,先采用0.1%亚甲蓝溶液进行黏膜染色,在识别局限性病灶(扁平、凹陷或息肉样)后,静脉注射10%荧光素钠5 ml,采用共聚焦激光显微内镜对其进行观察。
结果显示,虽然色素+共聚焦激光显微内镜组活检标本数量下降了50%(P=0.008),但是其上皮内瘤变的识别率却比普通内镜组高4.75倍。共聚焦激光显微内镜在体诊断的总准确度达97.8%,敏感性为94.7%,特异性为98.3%。
肠道上皮间隙的识别
有研究发现,小鼠小肠上皮细胞脱落所导致的肠道上皮间隙(gaps)是肠黏膜屏障的重要组成部分,但组织固定、切片形成过程中的假象会严重干扰对gaps的识别。Kiesslich的一项研究表明,共聚焦激光显微内镜可进行人活体肠道上皮杯状细胞以及gaps的鉴别,从而为gaps的研究提供了重要的手段。
研究纳入17例因为不明原因腹痛或肿瘤筛查而接受结肠镜检查的患者,研究者在患者末端回肠和直肠黏膜表面喷洒吖啶黄后,应用共聚焦激光显微内镜分别进行观察。
结果显示,在患者末端回肠和直肠黏膜,可见到约单个上皮细胞大小的吖啶黄未染色区域,其中一种无核结构的未染色区域经证实为gaps,另一种具有“靶征”的未染色区域经证实为杯状细胞。
此外,研究者还发现,肿瘤坏死因子α可使肠上皮细胞的脱落增加27倍,并造成20%的gaps丧失屏障功能。
胶原性结肠炎的诊断
胶原性结肠炎是显微镜结肠炎的一种,它是以病因不明的慢性水泻为特征,其典型的组织病理学特征为处于基膜之下的上皮下胶原层弥漫性增厚以及黏膜固有层非特异性的慢性炎症浸润。通常情况下,患者结直肠黏膜的内镜下表现正常,其诊断有赖于活检及组织学检查。Kiesslich等首次采用荧光素钠辅助的共聚焦激光显微内镜对胶原性结肠炎做出了快速诊断。
结果显示,共聚焦激光显微内镜下可见上皮下增厚的胶原层,与组织学检查结果相一致,且胶原层在结肠的分布是片状的或节段性的。研究者认为,共聚焦激光显微内镜可以用来定位和测定黏膜层胶原层,并为其靶向活检提供了可能。
Barrett食管及其瘤变的诊断
Barrett 食管是指食管下段复层鳞状上皮被单层柱状上皮所取代的病理现象,患者发生食管腺癌的几率比普通人高30~100倍,因此,对其进行随访和监测非常重要。Kiesslich等的研究表明,共聚焦激光显微内镜可在内镜检查的同时对Barrett食管黏膜实施在体组织学检查,且诊断准确度高。
研究者采用共聚焦激光显微内镜对整个柱状上皮食管下段进行检查,同时在检查部位行活检或内镜下黏膜切除,将获取的标本送组织学检查。并根据Barrett食管共聚焦图像分类系统,对储存的共聚焦图像进行再评价,以预测Barrett食管的组织学诊断。
结果显示,共聚焦激光显微内镜检查可清晰显示Barrett食管上皮细胞及微血管的改变,进而区分不同类型上皮。共聚焦激光显微内镜检查预测Barrett食管及其瘤变的敏感度分别为98.1%和92.9%,特异度为94.1%和98.4%,准确度为96.8%和97.4%。
食管早期鳞状细胞癌的诊断
食管早期鳞状细胞癌较难识别,共聚焦激光显微内镜为这一问题的解决带来了新的方法。Pech等的一项前瞻性研究显示,共聚焦激光显微内镜检查能够为早期鳞状细胞癌提供高准确度的“光学活检”,因而能够在内镜检查的同时做出即时诊断。
研究共纳入怀疑早期食管鳞状细胞癌的21例患者,0.5% 碘溶液染色后,静脉注射10%荧光素钠5ml,采用共聚焦激光显微内镜对未染色区域进行观察,将共聚焦图像收集并存储,同时对每个检查部位行活检。
结果显示,在21例患者中,共检出43个未被碘染色的部位,其中27个(63%)经组织学检查确诊为肿瘤,而这27个部位均被共聚焦激光显微内镜检出。但值得注意的是,共聚焦激光显微内镜还将2例(12.5%)良性病变误诊为肿瘤。最终,共聚焦激光显微内镜检查在体诊断的总准确度为95%,敏感性和特异性分别为100%和87%。
(参考文献从略)
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